Υπολογιστής Απόδοσης qPCR
Εισαγάγετε την κλίση της πρότυπης καμπύλης qPCR σας (Ct ή Cq σε γράφημα έναντι log10 της αρχικής ποσότητας) για να υπολογίσετε την εκτιμώμενη απόδοση ενίσχυσης. Είναι υπολογισμός από την κλίση που παρέχετε, όχι επικύρωση της δοκιμασίας σας.
Τελευταία ενημέρωση: September 25, 2026
Συχνές ερωτήσεις
Ποια κλίση δίνει 100% απόδοση;
Μια κλίση ακριβώς -3,32 (πιο ακριβώς, -1/log10(2)) αντιστοιχεί σε 100% απόδοση, δηλαδή η ποσότητα προϊόντος διπλασιάζεται σε κάθε κύκλο.
Γιατί μια έγκυρη κλίση είναι αρνητική;
Σε μια τυπική πρότυπη καμπύλη qPCR, οι τιμές Ct (ή Cq) μειώνονται καθώς αυξάνεται η αρχική ποσότητα εκμαγείου, οπότε η κλίση είναι κανονικά αρνητική. Αυτός ο υπολογιστής επισημαίνει μια θετική κλίση ως απίθανο να αντιπροσωπεύει έγκυρη πρότυπη καμπύλη.
Ποιο εύρος απόδοσης θεωρείται αποδεκτό;
Διαφορετικά εργαστήρια και τύποι δοκιμασιών εφαρμόζουν διαφορετικά αποδεκτά εύρη, και αυτό ποικίλλει με τη χημεία αντίδρασης και τις απαιτήσεις. Αυτός ο υπολογιστής δεν ορίζει κατώφλι επιτυχίας/αποτυχίας· ερμηνεύστε το αποτέλεσμα χρησιμοποιώντας τα κριτήρια επικύρωσης της δικής σας δοκιμασίας.
Τι μπορεί να προκαλέσει απόδοση μακριά από το 100%;
Συνήθεις αιτίες περιλαμβάνουν σφάλματα πιπετάρισματος ή αραίωσης στην πρότυπη καμπύλη, αναστολείς PCR που μεταφέρθηκαν στο εκμαγείο, μη βέλτιστο σχεδιασμό ή συγκέντρωση εκκινητών, και δευτεροταγή δομή του αμπλικονίου. Η αντιμετώπιση προβλημάτων εξαρτάται από τη συγκεκριμένη δοκιμασία σας.
Πώς διαφέρει από τον Υπολογιστή Θερμοκρασίας Υβριδισμού;
Ο Υπολογιστής Θερμοκρασίας Υβριδισμού εκτιμά μια παράμετρο κύκλου PCR από τις θερμοκρασίες τήξης των εκκινητών, πριν δημιουργήσετε δεδομένα. Αυτό το εργαλείο αναλύει την κλίση από μια ήδη ολοκληρωμένη εκτέλεση πρότυπης καμπύλης.
Αντικαθιστά αυτό τις διαδικασίες ελέγχου ποιότητας εργαστηρίου;
Όχι. Εκτελεί έναν συγκεκριμένο υπολογισμό από μια κλίση που παρέχετε. Η κατάλληλη επικύρωση δοκιμασίας περιλαμβάνει επαναλήψεις, μάρτυρες και κριτήρια ειδικά για το εργαστήριο και την εφαρμογή σας.