Calculadora de Eficiência de qPCR
Insira a inclinação da sua curva padrão de qPCR (Ct ou Cq plotado contra log10 da quantidade inicial) para calcular a eficiência de amplificação estimada. É um cálculo a partir da inclinação que você fornece, não uma validação do seu ensaio.
Última atualização: September 25, 2026
Perguntas frequentes
Que inclinação dá 100% de eficiência?
Uma inclinação de exatamente -3,32 (mais precisamente, -1/log10(2)) corresponde a 100% de eficiência, ou seja, a quantidade de produto dobra a cada ciclo.
Por que uma inclinação válida é negativa?
Em uma curva padrão de qPCR típica, os valores de Ct (ou Cq) diminuem à medida que a quantidade inicial de molde aumenta, então a inclinação normalmente é negativa. Esta calculadora sinaliza uma inclinação positiva como improvável de representar uma curva padrão válida.
Que faixa de eficiência é considerada aceitável?
Diferentes laboratórios e tipos de ensaio aplicam faixas aceitáveis diferentes, e isso varia com a química da reação e os requisitos. Esta calculadora não define um limite de aprovação/reprovação; interprete o resultado usando os critérios de validação do seu próprio ensaio.
O que pode causar uma eficiência longe de 100%?
Causas comuns incluem erros de pipetagem ou diluição na curva padrão, inibidores de PCR carregados no molde, design ou concentração de primers subótimos, e estrutura secundária do amplicon. A resolução de problemas depende do seu ensaio específico.
Como isto difere da Calculadora de Temperatura de Anelamento?
A Calculadora de Temperatura de Anelamento estima um parâmetro de ciclagem de PCR a partir das temperaturas de fusão dos primers, antes de gerar quaisquer dados. Esta ferramenta analisa a inclinação de uma curva padrão já concluída.
Isto substitui os procedimentos de controle de qualidade laboratorial?
Não. Realiza um cálculo específico a partir de uma inclinação que você fornece. A validação adequada do ensaio envolve réplicas, controles e critérios específicos do seu laboratório e aplicação.