qPCR効率計算機
qPCR標準曲線の傾き(CtまたはCqを初期量のlog10に対してプロットしたもの)を入力すると、推定増幅効率が計算されます。これは入力した傾きからの計算であり、アッセイの検証ではありません。
最終更新日： September 25, 2026
よくある質問
どの傾きで100%効率になりますか?
正確に-3.32(より正確には-1/log10(2))の傾きが100%効率に相当し、つまり産物量が各サイクルで倍になることを意味します。
なぜ有効な傾きは負なのですか?
典型的なqPCR標準曲線では、初期鋳型量が増えるほどCt(またはCq)値が減少するため、傾きは通常負になります。この計算機は正の傾きを有効な標準曲線を表す可能性が低いとして警告します。
どの効率範囲が許容されるとみなされますか?
研究室やアッセイの種類によって許容範囲は異なり、反応の化学的性質や要件によっても変わります。この計算機は合否の閾値を設定しません。ご自身のアッセイの検証基準を使って結果を解釈してください。
100%から大きく外れる効率の原因は何ですか?
よくある原因には、標準曲線でのピペット操作や希釈の誤り、鋳型に持ち込まれたPCR阻害物質、プライマー設計や濃度の最適でなさ、アンプリコンの二次構造などがあります。トラブルシューティングは特定のアッセイによります。
アニーリング温度計算機とどう違いますか?
アニーリング温度計算機は、データを生成する前にプライマーの融解温度からPCRサイクルパラメータを推定します。このツールは、すでに完了した標準曲線の実行から傾きを分析します。
これは実験室のQC手順の代わりになりますか?
いいえ。入力した傾きから特定の計算を行うだけです。適切なアッセイ検証には、複製、対照、そして研究室と用途に固有の基準が必要です。