Calcolatore di Efficienza qPCR
Inserisci la pendenza della tua curva standard qPCR (Ct o Cq tracciato rispetto al log10 della quantità iniziale) per calcolare l'efficienza di amplificazione stimata. È un calcolo dalla pendenza che fornisci, non una convalida del tuo saggio.
Ultimo aggiornamento: September 25, 2026
Domande frequenti
Quale pendenza dà il 100% di efficienza?
Una pendenza di esattamente -3,32 (più precisamente, -1/log10(2)) corrisponde al 100% di efficienza, cioè la quantità di prodotto raddoppia a ogni ciclo.
Perché una pendenza valida è negativa?
In una tipica curva standard qPCR, i valori di Ct (o Cq) diminuiscono man mano che aumenta la quantità iniziale di stampo, quindi la pendenza è normalmente negativa. Questo calcolatore segnala una pendenza positiva come improbabile che rappresenti una curva standard valida.
Quale intervallo di efficienza è considerato accettabile?
Laboratori e tipi di saggio diversi applicano intervalli accettabili diversi, e questo varia con la chimica di reazione e i requisiti. Questo calcolatore non fissa una soglia pass/fail; interpreta il risultato usando i criteri di convalida del tuo saggio.
Cosa può causare un'efficienza lontana dal 100%?
Cause comuni includono errori di pipettaggio o diluizione nella curva standard, inibitori PCR trascinati nello stampo, design o concentrazione subottimale dei primer, e struttura secondaria dell'amplicone. La risoluzione dei problemi dipende dal tuo saggio specifico.
In cosa differisce dal Calcolatore della Temperatura di Annealing?
Il Calcolatore della Temperatura di Annealing stima un parametro di ciclizzazione PCR dalle temperature di fusione dei primer, prima di generare dati. Questo strumento analizza la pendenza da una curva standard già completata.
Questo sostituisce le procedure di controllo qualità del laboratorio?
No. Esegue un calcolo specifico da una pendenza che fornisci. Una corretta convalida del saggio richiede repliche, controlli e criteri specifici del tuo laboratorio e applicazione.