Υπολογιστής Συγκέντρωσης DNA
Εισαγάγετε την ένδειξη απορρόφησης A260, τον συντελεστή αραίωσης, και τον τύπο νουκλεϊκού οξέος για να υπολογίσετε τη συγκέντρωση χρησιμοποιώντας τυπικούς φασματοφωτομετρικούς συντελεστές μετατροπής.
Τελευταία ενημέρωση: September 22, 2026
Συχνές ερωτήσεις
Γιατί υπάρχουν διαφορετικοί συντελεστές μετατροπής για dsDNA, ssDNA, και RNA;
Κάθε τύπος νουκλεϊκού οξέος έχει διαφορετική χαρακτηριστική απορρόφηση ανά μονάδα συγκέντρωσης στα 260 nm λόγω διαφορών στη στοίβαξη βάσεων και τη δομή - το δίκλωνο DNA απορροφά λιγότερο ανά μονάδα μάζας από το μονόκλωνο DNA ή το RNA επειδή η στοίβαξη βάσεων στη διπλή έλικα μειώνει την απορρόφηση (υποχρωμία). Η χρήση του σωστού συντελεστή για τον πραγματικό τύπο δείγματός σας είναι απαραίτητη για ακριβές αποτέλεσμα.
Τι γίνεται αν δεν αραιώσω το δείγμα μου πριν τη μέτρηση;
Εισαγάγετε συντελεστή αραίωσης 1, που σημαίνει καμία αραίωση - ο υπολογιστής θα χρησιμοποιήσει απευθείας την ένδειξη A260 σας. Συντελεστής αραίωσης μεγαλύτερος από 1 σημαίνει ότι αραιώσατε το αρχικό δείγμα πριν τη μέτρηση, και ο υπολογιστής κλιμακώνει το αποτέλεσμα προς τα πάνω για να αντικατοπτρίζει τη συγκέντρωση του αρχικού, μη αραιωμένου δείγματος.
Πώς διαφέρει αυτό από τον Υπολογιστή Αραίωσης Κυττάρων;
Αυτός ο Υπολογιστής Συγκέντρωσης DNA προσδιορίζει τη συγκέντρωση ενός δείγματος νουκλεϊκού οξέος από μια ένδειξη απορρόφησης φασματοφωτόμετρου - απαντά στο "ποια συγκέντρωση έχω πραγματικά;" Ο Υπολογιστής Αραίωσης Κυττάρων αντίθετα απαντά σε διαφορετική ερώτηση: δεδομένης μιας γνωστής συγκέντρωσης stock και μιας συγκέντρωσης-στόχου, πόσο διάλυμα stock και αραιωτικό χρειάζεστε να συνδυάσετε; Χρησιμοποιήστε αυτό το εργαλείο για να μετρήσετε τι έχετε, και τον Υπολογιστή Αραίωσης Κυττάρων για να σχεδιάσετε πώς να το αραιώσετε σε μια συγκέντρωση-στόχο.
Μια υψηλή ένδειξη A260 σημαίνει πάντα υψηλή καθαρότητα DNA;
Όχι - η απορρόφηση A260 μόνη της μετρά τη συνολική απορρόφηση σε εκείνο το μήκος κύματος, που μπορεί να περιλαμβάνει ρύπους όπως υπολειπόμενη πρωτεΐνη, φαινόλη, ή μόλυνση RNA σε μια παρασκευή DNA, όχι μόνο το νουκλεϊκό οξύ ενδιαφέροντος. Η καθαρότητα συνήθως αξιολογείται ξεχωριστά χρησιμοποιώντας τον λόγο A260/A280 (περίπου 1,8 για καθαρό DNA, περίπου 2,0 για καθαρό RNA) μαζί με τη συγκέντρωση που υπολογίζεται εδώ.
Ποια είναι μια τυπική ένδειξη A260 για ένα χρησιμοποιήσιμο δείγμα DNA;
Ποικίλλει τεράστια ανά εφαρμογή και μέθοδο εξαγωγής - από πολύ αραιά (A260 πολύ κάτω από 0,1) έως αρκετά συμπυκνωμένα (A260 1 ή περισσότερο) δείγματα μπορεί να είναι χρησιμοποιήσιμα ανάλογα με το για τι χρειάζεστε το DNA. Δεν υπάρχει μία ενιαία "φυσιολογική" ένδειξη - ελέγξτε τις απαιτήσεις συγκέντρωσης για τη συγκεκριμένη επόμενη εφαρμογή σας.
Γιατί το αποτέλεσμα δείχνει τόσο µg/mL όσο και ng/µL;
Τα µg/mL και ng/µL είναι αριθμητικά ισοδύναμα (1 µg/mL = 1 ng/µL), αλλά διαφορετικά εργαστήρια και πρωτόκολλα συνήθως αναφέρουν τη συγκέντρωση στο ένα ή το άλλο - η εμφάνιση και των δύο εξοικονομεί μια χειροκίνητη μετατροπή ανεξάρτητα από το ποια μονάδα αναμένει το πρωτόκολλό σας ή η επόμενη εφαρμογή.