เครื่องคำนวณความเข้มข้นของดีเอ็นเอ
ป้อนค่าการอ่านการดูดกลืนแสง A260 อัตราการเจือจาง และชนิดของกรดนิวคลีอิก เพื่อคำนวณความเข้มข้นโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การแปลงทางสเปกโตรโฟโตเมตริกมาตรฐาน
อัปเดตล่าสุด: September 22, 2026
คำถามที่พบบ่อย
ทำไมจึงมีค่าสัมประสิทธิ์การแปลงที่แตกต่างกันสำหรับ dsDNA, ssDNA และ RNA?
กรดนิวคลีอิกแต่ละชนิดมีค่าการดูดกลืนแสงเฉพาะที่แตกต่างกันต่อหน่วยความเข้มข้นที่ 260 นาโนเมตร เนื่องจากความแตกต่างในการเรียงซ้อนของเบสและโครงสร้าง - DNA สายคู่ดูดกลืนแสงน้อยกว่าต่อหน่วยมวลเมื่อเทียบกับ DNA สายเดี่ยวหรือ RNA เพราะการเรียงซ้อนของเบสในเกลียวคู่ลดการดูดกลืนแสง (hypochromicity) การใช้ค่าสัมประสิทธิ์ที่ถูกต้องสำหรับชนิดตัวอย่างจริงของคุณเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับผลลัพธ์ที่แม่นยำ
ถ้าฉันไม่เจือจางตัวอย่างก่อนวัดล่ะ?
ป้อนอัตราการเจือจางเป็น 1 หมายถึงไม่มีการเจือจาง - เครื่องคำนวณจะใช้ค่าการอ่าน A260 ของคุณโดยตรง อัตราการเจือจางที่มากกว่า 1 หมายความว่าคุณได้เจือจางตัวอย่างเดิมก่อนวัด และเครื่องคำนวณจะปรับผลลัพธ์กลับขึ้นเพื่อสะท้อนความเข้มข้นของตัวอย่างเดิมที่ยังไม่เจือจาง
สิ่งนี้แตกต่างจากเครื่องคำนวณการเจือจางเซลล์อย่างไร?
เครื่องคำนวณความเข้มข้นของดีเอ็นเอนี้กำหนดความเข้มข้นของตัวอย่างกรดนิวคลีอิกจากค่าการอ่านการดูดกลืนแสงของสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ - ตอบคำถาม "ฉันมีความเข้มข้นเท่าใดจริงๆ?" ในขณะที่เครื่องคำนวณการเจือจางเซลล์ตอบคำถามที่แตกต่างกัน: เมื่อทราบความเข้มข้นสต็อกและความเข้มข้นเป้าหมายแล้ว คุณต้องผสมสารละลายสต็อกและสารเจือจางเท่าใด ใช้เครื่องมือนี้เพื่อวัดสิ่งที่คุณมี และใช้เครื่องคำนวณการเจือจางเซลล์เพื่อวางแผนวิธีเจือจางให้ได้ความเข้มข้นเป้าหมาย
ค่าการอ่าน A260 ที่สูงหมายถึงความบริสุทธิ์ของดีเอ็นเอที่สูงเสมอหรือไม่?
ไม่ใช่ - การดูดกลืนแสง A260 เพียงอย่างเดียววัดการดูดกลืนแสงทั้งหมดที่ความยาวคลื่นนั้น ซึ่งอาจรวมถึงสิ่งปนเปื้อน เช่น โปรตีนตกค้าง ฟีนอล หรือการปนเปื้อนของ RNA ในการเตรียม DNA ไม่ใช่แค่กรดนิวคลีอิกที่สนใจเท่านั้น โดยทั่วไปความบริสุทธิ์จะถูกประเมินแยกต่างหากโดยใช้อัตราส่วน A260/A280 (ประมาณ 1.8 สำหรับ DNA บริสุทธิ์ ประมาณ 2.0 สำหรับ RNA บริสุทธิ์) ควบคู่ไปกับความเข้มข้นที่คำนวณได้ที่นี่
ค่าการอ่าน A260 ทั่วไปสำหรับตัวอย่างดีเอ็นเอที่ใช้งานได้คือเท่าไร?
แตกต่างกันอย่างมากตามการใช้งานและวิธีการสกัด - ตั้งแต่ตัวอย่างที่เจือจางมาก (A260 ต่ำกว่า 0.1 มาก) ไปจนถึงเข้มข้นพอสมควร (A260 1 หรือมากกว่า) อาจใช้งานได้ขึ้นอยู่กับว่าคุณต้องการดีเอ็นเอไปทำอะไร ไม่มีค่าการอ่าน "ปกติ" เพียงค่าเดียว - ตรวจสอบข้อกำหนดความเข้มข้นสำหรับการใช้งานปลายทางเฉพาะของคุณ
ทำไมผลลัพธ์จึงแสดงทั้ง µg/mL และ ng/µL?
µg/mL และ ng/µL มีค่าเท่ากันทางตัวเลข (1 µg/mL = 1 ng/µL) แต่ห้องปฏิบัติการและโปรโตคอลต่างๆ มักรายงานความเข้มข้นในหน่วยใดหน่วยหนึ่ง - การแสดงทั้งสองช่วยประหยัดการแปลงหน่วยด้วยตนเอง ไม่ว่าโปรโตคอลหรือการใช้งานปลายทางของคุณจะคาดหวังหน่วยใดก็ตาม